Abstract
เหตุผลของการทำวิจัย : ปัจจุบันน้ำยาตรวจหมู่โลหิต anti-M ของศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติ สภากาชาดไทย ผลิตขึ้นมาจากการฉีดกระตุ้นกระต่าย (rabbit polyclonal antibody) แอนติบอดีที่ผลิตได้มีความจำเพาะไม่คงที่และความแรงที่ได้ ค่อนข้างต่ำ วัตถุประสงค์ : เพื่อพัฒนาการผลิตน้ำยาตรวจหมู่โลหิตโมโนโคลนัล anti-M วัสดุและวิธีการ : ใช้เทคนิคการเชื่อมเซลล์ระหว่าง B-lymphocyte ที่มีการสร้าง anti-M กับเซลล์มะเร็งสายพันธุ์เดียวกัน (JMS-3) ทำให้ได้เซลล์สายพันธุ์ที่คงทน ในการสร้าง anti-M จากนั้นนำน้ำเลี้ยงเซลล์ที่ได้จากโคลนใหม่ (clone 1F9) มาศึกษาคุณสมบัติต่าง ๆ โดยเปรียบเทียบกับ rabbit polyclonal anti-M ของศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติเดิม และ monoclonal anti-M ของบริษัท ต่างประเทศ ผลการศึกษา : พบว่าน้ำยา human monoclonal anti-M (clone 1F9) ที่พัฒนาขึ้นใหม่ มีความแรงของแอนติบอดี (potency) ดีกว่าน้ำยาตรวจหมู่โลหิต rabbit polyclonal anti-M ของศูนย์บริการโลหิตแห่งชาติเดิมและเทียบเท่าหรือ ดีกว่า monoclonal anti-M ของบริษัทต่างประเทศ ด้านความเร็วของ แอนติบอดี (avidity) ในการเกิดปฏิกิริยากับเม็ดเลือดแดงหมู่โลหิตที่มี M-antigen positive บนสไลด์ พบว่ามีความเร็วเฉลี่ย 1 - 2 วินาที ซึ่งไม่แตกต่างกันในน้ำยาทั้ง 3 ชนิด ด้านความจำเพาะของแอนติบอดี (specificity) พบว่าให้ผลถูกต้องแม่นยำร้อยละ 100 โดยให้ปฏิกิริยา ผลบวกกับเม็ดเลือดแดงหมู่โลหิตที่มี M-antigen positive จำนวน 800 ราย ให้ปฏิกิริยาผลลบกับเม็ดเลือดแดงหมู่โลหิตที่มี M-antigen negative จำนวน 400 ราย และยังให้ปฏิกิริยาผลลบทั้งหมดกับ papainized identification panel cells (Lot 58040) ด้านความคงทนของแอนติบอดี (stability) พบว่าสามารถเก็บ human monoclonal anti-M (clone 1F9) ไว้ที่อุณหภูมิ 4C ได้มากกว่า 18 เดือน โดยที่ความแรงไม่ลดลง ด้านผล ของ pH ต่อการเกิดปฏิกิริยาของแอนติบอดี พบว่าน้ำยาทั้ง 3 ชนิด สามารถทำปฏิกิริยาได้ดีในช่วง pH ที่กว้างคือ pH 5 ถึง pH 9 ส่วนในด้าน ผลของอุณหภูมิต่อการเกิดปฏิกิริยาของแอนติบอดีพบว่าน้ำยา human monoclonal anti-M (clone 1F9) สามารถทำปฏิกิริยาได้ดีที่อุณหภูมิต่ำ คือเกิดปฏิกิริยาที่อุณหภูมิ 4C และ 20 - 25C (อุณหภูมิห้อง) ได้ดีกว่า ที่อุณหภูมิ 37C สรุป : จากคุณสมบัติต่าง ๆ ที่ได้ทำการทดสอบทั้งหมดนี้ แสดงให้เห็นว่า การพัฒนาการผลิตน้ำยาตรวจหมู่โลหิตโมโนโคลนัล anti-M ในครั้งนี้ เหมาะที่จะนำมาผลิตเป็นน้ำยาตรวจหมู่โลหิต human monoclonal anti-M เพื่อใช้ในงานธนาคารเลือดต่อไป.
DOI
10.58837/CHULA.CMJ.60.1.8
First Page
101
Last Page
113
Recommended Citation
บุญให้, สมพงศ์; เอี่ยมอัมพร, กาญจนา; and ติ่งต้อย, อุดม
(2016)
"การผลิตน้ำยาตรวจหมู่โลหิต anti-M ด้วยวิธี human hybridoma technology,"
Chulalongkorn Medical Journal: Vol. 60:
Iss.
1, Article 8.
DOI: https://doi.org/10.58837/CHULA.CMJ.60.1.8
Available at:
https://digital.car.chula.ac.th/clmjournal/vol60/iss1/8