Chulalongkorn University Theses and Dissertations (Chula ETD)

Other Title (Parallel Title in Other Language of ETD)

ฤทธิ์ยับยั้งการกระตุ้นเซลล์แมคโครฟาจ RAW 264.7 ด้วยแอลพีเอสของสารที่แยกได้จากสารสกัดเอทิลอะซิเตทจากใบและกิ่งของ Glycosmis parva

Year (A.D.)


Document Type


First Advisor

Wacharee Limpanasithikul

Second Advisor

Chaisak Chansriniyom


Graduate School (บัณฑิตวิทยาลัย)

Degree Name

Doctor of Philosophy

Degree Level

Doctoral Degree

Degree Discipline





Macrophages play major roles to produce several inflammatory mediators in many chronic inflammatory diseases. Current anti-inflammatory drugs target these mediators to alleviate inflammation symptoms. Searching for new anti-inflammatory agents is always needed due to problems from currently used anti-inflammatory drugs. This study aimed to investigate the anti-inflammatory potential of three main compounds, arborinine, N-methylatalaphylline and S-deoxydihydroglyparvin (DDGP), isolated from Glycosmis parva leaves and branches on lipopolysaccharide (LPS)-activated macrophage RAW 264.7 cells. Only DDGP demonstrated a potent inhibitor of LPS-activated macrophages. It inhibited expression of inducible nitric oxide synthase and decreased nitric oxide production with IC50 3.47 ± 0.1 µM. It suppressed the mRNA expression and the protein production of pro-inflammatory cytokines, tumor necrosis factor-α, interleukin (IL)-1β, and IL-6. LPS activates these cytokine productions at the early step of LPS-induced macrophage activation. DDGP also decreased the mRNA expression of monocyte chemoattractant protein-1 and macrophage inflammatory protein-1α, and two enzymes, cyclooxygenase-2 and mitochondrial prostaglandin (PG) E synthase, for PGE2 synthesis. Additionally, it inhibited PGE2 production. It had little or no effect on modulating anti-inflammatory molecules. Effects of DDGP on LPS signaling pathways were also evaluated. DDGP profoundly decreased phosphorylated p38 MAP kinase. It had little or no effect on the phosphorylation of c-Jun N-terminal kinase and extracellular-signal-regulated kinase, and on nuclear factor- κB activation. These results suggested that DDGP inhibited expression and production of inflammatory molecules in LPS-activated macrophages via suppressing p38 MAPK activation. DDGP may be a good candidate anti-inflammatory agent.

Other Abstract (Other language abstract of ETD)

แมคโครฟาจเป็นเซลล์ที่สร้างสารต่างๆหลายชนิดที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบในโรคที่มีการอักเสบแบบเรื้อรัง สารเหล่านี้เป็นเป้าหมายการออกฤทธิ์เพื่อบรรเทาอาการอักเสบของยาต้านอักเสบที่มีใช้ในปัจจุบัน ได้แก่ ยากลุ่มสเตียรอยด์ ยาต้านอักเสบที่ไม่ใช่สเตียรอย์ และยาต้านไซโตไคน์ แต่จากปัญหาจากการใช้ยาเหล่านี้ทำให้ยังมีความจำเป็นที่ต้องพัฒนายาต้านอักเสบตัวใหม่อย่างต่อเนื่อง งานวิจัยนี้มีเป้าหมายเพื่อศึกษาศักยภาพการเป็นสารต้านอักเสบของสารประกอบหลักสามตัว คือ arborinine, N-methylatalaphylline and S-deoxydihydroglyparvin (DDGP) ที่แยกได้จากสารสกัดเอทธิลอะซีเตตของกิ่งและใบจากพืช Glycosmis parva ต่อเซลล์แมคโครฟาจ RAW 264.7 ที่ถูกกระตุ้นด้วยไลโปโพลีแซคคาไรด์ (แอลพีเอส) ผลการศึกษามีเพียงสาร DDGP เท่านั้นที่มีความแรงสูงในการเป็นสารต้านอักเสบ พบว่า ในเซลล์แมคโครฟาจที่ถูกกระตุ้นด้วยแอลพีเอส DDGP ยับยั้งการแสดงออกของเอนไซม์ไนตริกออกไซด์ซินเตสและยับยั้งการสร้างไนตริกออกไซด์โดยมีค่า IC50 เท่ากับ 3.47 ± 0.1 µM สารนี้ยับยั้งการแสดงออกในระดับ mRNA และยับยั้งการสร้างระดับโปรตีนของไซโตไคน์ tumor necrosis factor-α, interleukin (IL)-1β, IL-6 โดยแอลพีเอส กระตุ้นการสร้างไซโตไคน์เหล่านี้ได้ในระยะแรกของการกระตุ้นเซลล์แมคโครฟาจ นอกจากนี้ DDGP ยังออกฤทธิ์ยับยั้งการแสดงออกของไซโตไคน์ monocyte chemoattractant protein-1 และ macrophage inflammatory protein-1α ยับยั้งการแสดงออกของเอนไซม์ cyclooxygenase-2 และ mitochondrial prostaglandin (PG) E synthase ที่ใช้สร้าง PGE2 และยับยั้งการสร้าง PGE2 สารนี้มีผลเพียงเล็กน้อยหรือไม่มีผลต่อการแสดงออกของโมเลกุลในกลุ่มยับยั้งการอักเสบ ผลของ DDGP ต่อโมเลกุลในการสื่อสัญญาณของแอลพีเอสเพื่อกระตุ้นเซลล์ พบว่า DDGP ยับยั้งการกระตุ้น p38 MAP kinase โดยยับยั้ง p38 phosphorylation ได้เกือบหมด มีผลเพียงเล็กน้อยหรือไม่มีผลต่อ phosphorylation ของ c-Jun N-terminal kinase และ extracellular-signal-regulated kinase และไม่มีผลเปลี่ยนแปลงการกระตุ้น nuclear factor kappa B ผลจากการศึกษานี้แสดงว่า S-deoxydihydroglyparvin ยับยั้งการสร้างโมเลกุลต่างๆที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบผ่านทางการยับยั้งการการกระตุ้น p38 ในเซลล์แมคโครฟาจที่ถูกกระตุ้นด้วยแอลพีเอส สารนี้อาจเป็นสารต้านอักเสบได้



To view the content in your browser, please download Adobe Reader or, alternately,
you may Download the file to your hard drive.

NOTE: The latest versions of Adobe Reader do not support viewing PDF files within Firefox on Mac OS and if you are using a modern (Intel) Mac, there is no official plugin for viewing PDF files within the browser window.