Chulalongkorn University Theses and Dissertations (Chula ETD)
การผลิตเพนนิซิลิน เอซิเลส จาก Proteus rettgeri ในถังหมัก
Other Title (Parallel Title in Other Language of ETD)
Production of penicillin acylase from proteus rettgeri in fermenter
Year (A.D.)
1990
Document Type
Thesis
First Advisor
สัณห์ พณิชยกุล
Faculty/College
Graduate School (บัณฑิตวิทยาลัย)
Degree Name
วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต
Degree Level
ปริญญาโท
Degree Discipline
เทคโนโลยีชีวภาพ
DOI
10.58837/CHULA.THE.1990.557
Abstract
Proteus rettgeri SPS-6 เป็นจุลชีพที่สามารถผลิตเอนไซม์เพนนิซิลน เอซิเลสได้แบบ con-stitutive เมื่อเจริญในอาหารสูตรปรับต่ำที่ใช้กลูโคสเป็นแหล่งต้นตอคาร์บอนเดี่ยว จากการศึกษาแหล่งต้นตอคาร์บอนที่เหมาะสมต่อการเจริญ และการผลิตเอนไซม์เพนนิซิลิน เอซิเลส ของ Proteus rettgeri SPS-6 ซึ่งเป็นสายพันธุ์ที่ผลิตเพนนิซิลิน เอซิเลสได้สูง พบว่า เมื่อเจริญ P. rettgeri SPS-6 ในอาหารสูตรปรับต่ำที่เสริมด้วยแป้งไฮโตรไลซ์ 1.0% ที่อุณหภูมิ 28 °ซ. จะให้แอคติวิตีของเอนไซม์สูงสุดประมาณ 160 หน่วย/มก.โปรตีนรวมของเซลล์ โดยที่การสังเคราะห์เอนไซม์เพนนิซิลิน เอซิเลส ของ P. rettgeri SPS-6 จะถูกกดดันด้วยปฏิกิริยาคะตาโบไลท์ รีเพรสชั่น เมื่อใช้ความเข้มข้นของแป้งไฮโดรไลซ์สูงกว่านี้ นอกจากนี้ ยังสามารถใช้สารละลายกลูโค-เดกตริน (แบะแซ) เป็นแหล่งต้นตอคาร์บอนได้ดีเช่นเดียวกัน แต่ไม่สามารถใช้กากน้ำตาล (10%) หรือกรดอะมิโนซีสเตอีน (0.25%) เป็นแหล่งต้นตอคาร์บอนของการเจริญ และผลิตเอนไซม์ได้ ในขณะที่ กรดอะมิโนแอสปาร์ติกสามารถเพิ่มการเจริญของสายพันธุ์ SPS-6 ได้สูงขึ้นแต่ความสามารถในการสังเคราะห์เพนนิซิลน เอซิเลสลดต่ำลง ส่วนกรดอะมิโนวาลีนจะยับยั้งทั้งการสั่งเคราะห์เอนไซม์และการเจริญ P. rettgeri SPS-6 สามารถใช้เกลือแอมโมเนียมซัลเฟต และยูเรียเป็นแหล่งต้นตอไนโตรเจนได้ดีพอ ๆ กัน ในขณะที่ สารละลายย่อยด้วยกรดกำมะถันของกากถั่วเหลืองจะมีผลไปยับยั้งการผลิตเอนไซม์เพนนิซิลิน เอซเลส และเมื่อลดอุณหภูมิของการเลี้ยงเชื้อลงที่ 25 °ซ. และปรับ pH เริ่มต้นของอาหารเลี้ยงเชื้อเป็น 7.8 เซลล์ P rettgeri SPS-6 จะให้แอคติวิตีของไซม์สูงขึ้นเกือบ 1.5 เท่า (280 หน่วย/มก.โปรตีนรวม) และในการศึกษาสภาวะที่เหมาะสมต่อการเจริญ และการผลิตเอนไซม์ของ P. rettgeri SPS-6 ในถังหมักขนาด 5 ลิตร พบว่า การใช้ความเร็วในการกวน 300 รอบ/นาที, อัตราการให้อากาศ 0.5 ปริมาตรอากาศ ต่อ ปริมาตรน้ำหนัก ต่อ นาที ควบคุมอุณหภูมิไว้ที่ 25 °ซ. เมื่อปรับ pH เริ่มต้นของอาหารเลี้ยงเชื้อเป็น 7.8 P. rettgeri SPS-6 จะให้ค่าแอคติวิตีสงสดของเอนไซม์สูงประมาณ 320 หน่วย/มก.โปรตีนรวม การป้อนกลูโคสอย่างต่อเนื่องเพื่อศึกษาระดับความเข้มข้นของกลูโคสในอาหารเลี้ยงเชื้อระหว่าง 2-3 มก./มล. ไม่มีผลในการเพิ่มแอคติวิตีของเพนนิซิลิน เอซิเลส แต่อย่างใด
Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-No Derivative Works 4.0 International License.
Recommended Citation
อานามนารถ, ศรินทิพ, "การผลิตเพนนิซิลิน เอซิเลส จาก Proteus rettgeri ในถังหมัก" (1990). Chulalongkorn University Theses and Dissertations (Chula ETD). 42838.
https://digital.car.chula.ac.th/chulaetd/42838