Chulalongkorn University Theses and Dissertations (Chula ETD)

การสร้างและการหลอมโพรโทพลาสต์ในไรโซเบียม บางสายพันธุ์

Other Title (Parallel Title in Other Language of ETD)

Formation and fusion of protoplasts in Rhizobium spp.

Year (A.D.)

1990

Document Type

Thesis

First Advisor

ไพเราะ ทิพยทัศน์

Faculty/College

Graduate School (บัณฑิตวิทยาลัย)

Degree Name

วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต

Degree Level

ปริญญาโท

Degree Discipline

ชีวเคมี

DOI

10.58837/CHULA.THE.1990.586

Abstract

TAL 141 ure his เป็นสายพันธุ์ไรโซเบียมเติบโตเร็วที่สามารถทนความเครียด ส่วน USDA 192 Trp Phe เป็น Rhizobium fredii และไม่สามารถทนความเครียด ได้นำสายพันธุ์ทั้งสองมาสร้างโพรโทพลาสต์ พบว่าการเติมไกลซีนที่ความเข้มข้นเหมาะสม จะช่วยให้ได้เซลล์ที่เตรียมโพรโทพลาสต์ได้ในเปอร์เซ็นต์สูง นอกจากนี้ยังพบว่าการเกิดโพรโทพลาสต์ปริมาณสูงสุดของ TAL 141 ure his ได้ผลเมื่อให้ไลโซไซม์ทำงานร่วมกับ GEDTA ในขณะที่ USDA 192 Trp Phe ต้องการไลโซไซม์ร่วมกับ EDTA ได้หลอมโพรโทพลาสต์โดยใช้ 15% PEG 6000 ที่ 42°ซ 5 นาทีเลือกโคโลนีที่สามารถเจริญได้ในอาหารสูตรปรับต่ำมาทำการแยกให้บริสุทธิ์ โดยมีความถี่ในการเกิดฟิวแซนต์ประมาณ 3.6x10⁻⁶ต่อเซลล์ ได้เลือกสายพันธุ์ชื่อ F11, F14, F15, F20 และ F36 เป็นตัวแทนในการศึกษา จากการศึกษาการเจริญในสภาวะที่กำหนด การทดสอบอิมมูโนวิทยาของฟิวแซนต์ การทดสอบรูปแบบของโครโมโซมที่ถูกย่อยด้วยเรสทริกซันเอนไซม์ และการสร้างปมของไรโซเบียมกับต้นถั่ว สรุปได้ว่า ทั้งห้าสายพันธุ์ควรเป็นฟิวแซนต์ดังต่อไปนี้ F11 เป็นอนุพันธ์ของ TAL 141 ส่วน F15, F20, และ F36 เป็นอนุพันธ์ของไรโซเบียมสายพันธุ์ USDA 192 โดยแต่ละสายพันธุ์จะมีการแลกเปลี่ยนยีน อย่างน้อยหนึ่งตำแหน่ง ยกเว้น F15 แสดงสรีรสมบัติเปลี่ยนแปลงพร้อมๆ กันถึงสี่ประการ สมบัติทางชีวภาพหลายอย่างที่แตกต่างเป็นอิสระจากไรโซเบียมสายพันธุ์พ่อแม่ ซึ่งแสดงว่ามีระคอมบิเนชันระหว่างสายพันธุ์เกิดขึ้นหลายตำแหน่ง

Link to Full Text

Share

COinS