Chulalongkorn University Theses and Dissertations (Chula ETD)

Other Title (Parallel Title in Other Language of ETD)

บทบาทของไตรเอริลมีเทน-34 ต่อช่องไอออนโพแทสเซียมชนิดโพแทสเซียมแคลเซียม 3.1 ต่อเซลล์ไลน์ไตแมวที่ถูกเหนี่ยวนำด้วยด๊อกโซรูบิซิน

Year (A.D.)


Document Type


First Advisor

Rosama Pusoonthornthum

Second Advisor

Chatsri Deachapunya


Faculty of Veterinary Science (คณะสัตวแพทยศาสตร์)

Department (if any)

Department of Veterinary Medicine (ภาควิชาอายุรศาสตร์ (คณะสัตวแพทยศาสตร์))

Degree Name

Master of Science

Degree Level

Master's Degree

Degree Discipline

Veterinary Medicine




Study involved with potassium channel KCa3.1 blocker (triarylmethane-34; TRAM-34) in doxorubicin (DOX)-induced feline kidney cells was performed. The study was divided into two parts. In part I, subtoxic dose of TRAM-34 in feline kidney cell lines was studied to determine the cytotoxicity of TRAM-34 in feline kidney cells by cytotoxicity assay. In part II, feline kidney cell lines were incubated with appropriate dose and time of TRAM-34 pretreatment for 24 h or 30 min and post-treatment for 24 h condition in DOX-induced cell toxicity. Cytotoxicity assay, apoptosis and necrosis assay and KCa3.1 protein expression were measured. The cytotoxicity results indicated no significantly differences in cell viability between cells treated with TRAM-34 at 0.1 to 100 µM concentration and negative control in 24 h but a significant reduction of cell surviving at 100 µM concentration of TRAM-34 in 48 h (p<0.05). We found subtoxic dose of TRAM-34 in feline kidney cells lines at the concentration 100 µM in 24 h, 50 µM in 48 h and 25 µM in 96 h when compared with the negative control. Pretreatment with TRAM-34 at 0.1 to 1 µM concentrations for 24 h had significantly higher percentages of cell viability (p<0.05) and significantly lower percentages of apoptotic cells respect to the total than DOX-treated control (p<0.05) but was not significantly different in percentages of necrosis cells than DOX-treated control. Moreover, Pretreatment with TRAM-34 at the 0.1 µM concentrations for 24 h had significantly decreased KCa3.1 protein expression when compared with DOX-treated control (p<0.05). Therefore, these findings suggested that TRAM-34 can protect feline kidney cells line from DOX-induced toxicity by inhibiting KCa3.1 channel. KCa3.1 channel blocker may be used as one of the potential therapeutic treatment for cats with naturally-occurring chronic kidney disease in the future.

Other Abstract (Other language abstract of ETD)

การศึกษาผลของการยับยั้งช่องไอออนโพแทสเซียมชนิดโพแทสเซียมแคลเซียม 3.1 (ไตรเอริลมีเทน-34 triarylmethane-34 (TRAM-34)) ต่อเซลล์ไลน์ไตแมวที่ถูกเหนี่ยวนำให้เกิดไตวายด้วยด๊อกโซรูบิซิน doxorubicin (DOX) การศึกษาแบ่งออกเป็นสองส่วน ส่วนที่หนึ่งศึกษาหาขนาดต่ำสุดของ TRAM-34 ที่ไม่ก่อให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์ไลน์ไตแมว โดย cytotoxicity assay ส่วนที่สองศึกษา TRAM-34 ในขนาดที่เหมาะสมถูกบ่มในเซลล์เพาะเลี้ยงไตแมวที่ถูกโน้มนำให้เป็นพิษด้วย DOX ก่อนการรักษาเป็นเวลา 24 ชั่วโมง หรือ 30 นาที และหลังการรักษา 24 ชั่วโมง โดยทำ cytotoxicity assay, apoptosis assay, necrosis assay และตรวจหาการแสดงออกของโปรตีนของช่องไอออนโพแทสเซียมแคลเซียม 3.1 ในเซลล์ไลน์ไตแมว ผลการศึกษาพบว่าอัตราการรอดของเซลล์ไลน์ไตแมวในกลุ่มที่ให้ TRAM-34 ที่ขนาด 0.1 ถึง 100 ไมโครโมลาร์ (µM) ไม่พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมใน 24 ชั่วโมง แต่พบอัตราการรอดของเซลล์ไลน์ไตแมวลดลงอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อใช้ TRAM-34 ที่ขนาด 100 µM ใน 48 ชั่วโมง (p<0.05) และขนาดยาต่ำสุดที่ไม่ทำให้เป็นพิษต่อเซลล์ไลน์ไตแมว คือ 100 µM ของ TRAM-34 ใน 24 ชั่วโมง, 50 µM ของ TRAM-34 ใน 48 ชั่วโมง และ 25 µM ของ TRAM-34 ใน 96 ชั่วโมง ตามลำดับ นอกจากนี้ยังพบว่าเซลล์ไลน์ไตแมวที่ให้ TRAM-34 ขนาด 0.1 ถึง 1 µM ที่ 24 ชั่วโมง ก่อนเหนี่ยวนำด้วย DOX มีเปอร์เซ็นต์การรอดชีวิตของเซลล์สูงกว่า และมีเปอร์เซ็นต์การตายแบบอะพอพโทซิส (apoptosis) น้อยกว่ากลุ่มควบคุม DOX อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p<0.05) แต่พบว่าไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติของเปอร์เซ็นต์การตายแบบเนโครซิส (necrosis) เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม DOX นอกจากนี้การให้ TRAM-34 ขนาด 0.1 µM ในเซลล์ไลน์ไตแมวก่อน 24 ชั่วโมงที่จะเหนี่ยวนำด้วย DOX พบว่ามีการลดลงของการแสดงออกของโปรตีนของช่องไอออนโพแทสเซียมแคลเซียม 3.1 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม DOX อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p<0.05) ดังนั้น TRAM-34 สามารถป้องกันเซลล์ไลน์ไตแมวจากการโน้มนำให้เกิดไตวายด้วย DOX โดยยับยั้งช่องไอออนโพแทสเซียมแคลเซียม 3.1 และอาจสามารถนำมาใช้ในการรักษาโรคไตเรื้อรังของแมวได้ในอนาคต



To view the content in your browser, please download Adobe Reader or, alternately,
you may Download the file to your hard drive.

NOTE: The latest versions of Adobe Reader do not support viewing PDF files within Firefox on Mac OS and if you are using a modern (Intel) Mac, there is no official plugin for viewing PDF files within the browser window.