Chulalongkorn University Theses and Dissertations (Chula ETD)
การผลิตลินามาเรสจากยีสต์
Other Title (Parallel Title in Other Language of ETD)
Production of linamarase from yeasts
Year (A.D.)
1990
Document Type
Thesis
First Advisor
สุมาลี พิชญางกูร
Faculty/College
Graduate School (บัณฑิตวิทยาลัย)
Degree Name
วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต
Degree Level
ปริญญาโท
Degree Discipline
จุลชีววิทยา
DOI
10.58837/CHULA.THE.1990.582
Abstract
ในการคัดแยกเชื้อยีสต์ 131 สายพันธุ์ที่แยกได้จากมันสำปะหลังสดหมัก พบว่ามีแอนติวิตีของเบต้า-กลูโคซีเคส 101 สายพันธุ์ เมื่อนำยีสต์ทั้ง 101 สายพันธุ์นั้นมาตรวจสอบแอคติวิตีของลินามาเรส พบว่า มี 42 สายพันธุ์ ที่มีลินามาเรสแอคติวิตีในอาหารที่มีลินามาริน และ 12 สายพันธุ์มีลินามา เรสแอคติวิตี ในอาหารที่ไม่มีลินามาริน ผลการทดลองพบว่า เอนไซม์ลินามาเรสจากยีสต์ที่ทำการศึกษาเป็นเอนไซม์ที่อยู่ภายในเซลล์และเชื้อยีสต์สายพันธุ์ B -1-14 ผลิตลินามาเรสที่มีแอคติวิตีสูงสุด มาเลี้ยงในอาหารเหลวที่มีกลูโคส 0.05% เป็นแหล่งคาร์บอน แบคโตเปปโตน 0.5% เป็นแหล่งไนโตรเจน ผงสกัดมอลท์ 0.3% และผงสกัดยีสต์ 0.3% เป็นแหล่งของวิตามิน และโปแตสเซียมไซนาไนด์ 40 ส่วนในล้านส่วน สภาวะที่เหมาะสมในการเลี้ยงเชื้อเพื่อการผลิตลินามาเรสโดยยีสต์สายพันธุ์ B-1-14 ได้แก่ ความเป็นกรดด่างเริ่มต้นของอาหารเลี้ยงเชื้อ 6.0 โดยเลี้ยงเชื้อที่ความเร็ว 150 รอบต่อนาที ที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 48 ชั่วโมง สามารถผลิตเอนไซม์ ลินามาเรสที่มีแอตดิวิตี 3.75 หน่วยต่อกรัมเซลล์เปียก ผลการทดลองสกัดและทำให้ลินามาเรสจากยีสต์สายพันธุ์ B-1-14 บริสุทธิ์ พบว่าการตกตะกอนเอนไซม์ด้วยแอมโมเนียซัลเฟตอิ่มตัว 30-60 % ตามด้วยการผ่านคอลัมน์ดีเออี-โตโยเพิร์ล 650 เอ็ม และคอลัมน์เจลพีลเตรยัน เอชดับเบิลยู-55 จะได้เอนไซม์ที่มีความบริสุทธิ์ขึ้น 61.5 เท่า และได้ปริมาณเอนไซม์ 41.2% เอนไซม์ลินามาเรสที่ได้มีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 110,000 ดาลตัน มีค่า Km ต่อลินามาริน และ PNPG เท่ากับ 2.94 และ 0.07 มิลลิโมลาร์ ตามลำดับ สภาวะที่เหมาะสมต่อการทำงานเอนไซม์คือ อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียส ที่ความเป็นกรดด่างเท่ากับ 6.5 เอนไซม์มีความเสถียรต่ออุณหภูมิในช่วง 20-45 องศาเซลเซียส ผลการศึกษาทางอนุกรมวิธาน เพื่อจำแนกชนิดของเชื้อยีสต์ สายพันธุ์ B-1-14 พบว่ายีสต์ สายพันธุ์ B-1-14 นี่อาจจะเป็น Hansenula anomala
Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-No Derivative Works 4.0 International License.
Recommended Citation
พุทธิขันธ์, ชัญญา, "การผลิตลินามาเรสจากยีสต์" (1990). Chulalongkorn University Theses and Dissertations (Chula ETD). 41096.
https://digital.car.chula.ac.th/chulaetd/41096